Моилтарин ба нокомиҳо ва ҳалли HPLC

Ҳамчун асбоби дақиқи баланд, HPLC метавонад ба осонӣ ба баъзе мушкилоти хурди душвор оварда расонад, агар он дар вақти истифода дуруст кор карда нашавад.Яке аз мушкилоти маъмултарин мушкилоти фишурдани сутун аст.Хроматографи ноқисро чӣ гуна зуд бартараф кардан мумкин аст.Системаи HPLC асосан аз шишаи обанбор, насос, инжектор, сутун, камераи ҳарорати сутун, детектор ва системаи коркарди маълумот иборат аст.Барои тамоми система сутунҳо, насосҳо ва детекторҳо ҷузъҳои асосӣ ва маконҳои асосие мебошанд, ки ба мушкилот дучор мешаванд.

Калиди фишори сутун ин соҳаест, ки ҳангоми истифодаи HPLC диққати махсусро талаб мекунад.Устувории фишори сутун ба шакли қуллаи хроматографӣ, самаранокии сутун, самаранокии ҷудокунӣ ва вақти нигоҳдорӣ зич алоқаманд аст.Устувории фишори сутун маънои онро надорад, ки арзиши фишор дар арзиши устувор устувор аст, балки диапазони тағирёбии фишор дар байни 345кПа ё 50PSI аст (имкон медиҳад, ки фишори сутун мӯътадил аст ва оҳиста тағйир меёбад).Фишори аз ҳад баланд ё хеле паст мушкилоти фишори сутун аст.

Моилтарин ба нокомиҳо ва ҳалли HPLC

1, фишори баланд мушкилоти маъмултарин дар истифодаи HPLC мебошад.Ин маънои якбора баланд шудани фишорро дорад.Дар маҷмӯъ, сабабҳои зерин вуҷуд доранд: (1) Дар маҷмӯъ, ин ба бастани канали ҷараён вобаста аст.Дар ин маврид, мо бояд онро ба қисмҳо тафтиш кунем.а.Аввал, вуруди насоси вакуумро буред.Дар ин лаҳза, найчаи PEEK бо моеъ пур карда шуд, то найчаи PEEK аз шишаи ҳалкунанда хурдтар бошад, то бубинад, ки моеъ бо хоҳиши худ мечакад ё не.Агар моеъ начакад ё оҳиста начакад, сари филтри ҳалкунанда баста мешавад.Табобат: ним соат дар кислотаи 30%-и нитрат тар карда, бо оби ултра соф дањонед.Агар моеъ ба таври тасодуфӣ чакад, сари филтри ҳалкунанда муқаррарӣ аст ва тафтиш карда мешавад;б.Клапани тозакуниро кушоед, то фазаи мобилӣ аз сутун нагузарад ва агар фишор ба таври назаррас коҳиш наёбад, сари сафеди филтр баста мешавад.Табобат: Сафедҳои филтршуда хориҷ карда шуданд ва бо 10% изопропанол барои ним соат соника карда шуданд.Фарз мекунем, ки фишор аз 100PSI паст мешавад, сари сафеди филтршуда муқаррарӣ аст ва тафтиш карда мешавад;в.Нуги баромади сутунро дур кунед, агар фишор паст нашавад, сутун баста мешавад.Табобат: Агар он басташавии намаки буферӣ бошад, то он даме, ки фишор муқаррарӣ шавад, 95% шуста кунед.Агар монеа аз ҷониби ягон маводи хеле нигоҳ дошташуда ба вуҷуд ояд, барои шитобон ба фишори муқаррарӣ ҷараёни қавитар аз марҳилаи ҳозираи мобилӣ бояд истифода шавад.Агар аз руи усули дар боло зикршуда фишори тозакунии дарозмуддат кам нашавад, даромаду баромади сутунро баръакс ба асбоб пайвастшуда хисоб кардан мумкин аст ва сутунро бо фазаи сайёр тоза кардан мумкин аст.Дар айни замон, агар фишори сутун то ҳол кам карда нашавад, лавҳаи ҷумбонидаи сутуни даромадгоҳро танҳо иваз кардан мумкин аст, аммо вақте ки амалиёт хуб нест, он осон аст, ки боиси кам шудани таъсири сутун гардад, бинобар ин кӯшиш кунед, ки камтар истифода баред.Барои мушкилоти душвор, иваз кардани сутун метавонад баррасӣ шавад.

(2) Танзими нодурусти суръати ҷараён: Меъёри дурусти ҷараёнро аз нав танзим кардан мумкин аст.

(3) Таносуби нодурусти ҷараён: шохиси часпакии таносуби гуногуни ҷараёнҳо гуногун аст ва фишори системаи мувофиқи ҷараён бо часпакии баландтар низ калонтар аст.Агар имконпазир бошад, ҳалкунандаҳои часпакии пасттарро иваз кардан ё аз нав танзим кардан ва омода кардан мумкин аст.

(4) Фишори сифри система: сифри сенсори сатҳи моеъро танзим кунед.

2, фишор хеле паст аст (1) одатан аз ихроҷи система ба вуҷуд меояд.Чӣ бояд кард: Ҳар як пайвастшавиро, махсусан интерфейсро дар ҳар ду канори сутун пайдо кунед ва майдони ихроҷро мустаҳкам кунед.Почтаро хориҷ кунед ва филми PTFE-ро бо қувваи мувофиқ мустаҳкам кунед ё пӯшед.

(2) Газ ба насос ворид мешавад, аммо фишор одатан дар ин вақт ноустувор аст, баланд ва паст.Ҷиддӣтар он аст, ки насос моеъро азхуд карда наметавонад.Усули табобат: клапани тозакуниро кушоед ва бо суръати ҷараёни 3~5мл/дақ тоза кунед.Дар акси ҳол, футурҳои ҳаво дар клапани ихроҷ бо истифода аз найчаи сӯзании махсус аспиратсия карда шуданд.

(3) Набудани марҳилаи мобилӣ: санҷед, ки оё дар шишаи обанбор марҳилаи мобилӣ вуҷуд дорад, оё раковина дар марҳилаи мобилӣ ғарқ шудааст ва ё насос кор мекунад.

(4) Клапани истинод баста нест: клапани истинод пас аз сустшавӣ баста мешавад.Он одатан ба 0,1 мерасад.~ 0,2 мл/дақ пас аз бастани клапани истинод.

Хулоса:

Дар ин мақола танҳо мушкилоти умумӣ дар хроматографияи моеъ таҳлил карда мешаванд.Албатта, дар татбиқи амалии худ мо бо мушкилоти дигар бештар рӯ ба рӯ мешавем.Ҳангоми коркарди хатоҳо мо бояд принсипҳои зеринро риоя кунем: танҳо як омилро дар як вақт тағир диҳед, то муносибати байни омили гипотетикӣ ва мушкилотро муайян кунед;Умуман, ҳангоми иваз кардани қисмҳо барои бартараф кардани мушкилот, мо бояд ба гузоштани қисмҳои шикасташуда диққат диҳем, то ки партовҳо пешгирӣ карда шаванд;Ташаккул додани одати хуби сабт гарави муваффақияти бартараф кардани хатогиҳо мебошад.Хулоса, ҳангоми истифодаи HPLC, муҳим аст, ки ба коркарди намунавӣ ва дуруст истифода ва нигоҳдории таҷҳизот диққат диҳед.