Дар тадқиқоти биологӣ одатан полипептидҳои пайдарпайии дароз истифода мешаванд.Барои пептидҳо бо зиёда аз 60 аминокислотаҳо дар пайдарпаӣ, барои ба даст овардани онҳо ифодаи ген ва SDS-PAGE истифода мешаванд.Бо вуҷуди ин, ин усул муддати тӯлонӣ мегирад ва самараи ҷудокунии маҳсулот хуб нест.
Мушкилот ва роҳҳои ҳалли синтези дарозмуддати пептидҳо
Дар синтези пептидхои дароз мо хамеша бо мушкилот дучор меоем, яъне монеаи стерикии реаксияи конденсат бо зиёд шудани пайдарпай дар синтез зиёд мешавад ва вакти реаксияро танзим кардан лозим меояд, то реаксия пурра анчом ёбад.Аммо, чӣ қадаре ки вақти реаксия дарозтар бошад, ҳамон қадар таъсири манфии зиёд ба вуҷуд меояд ва як қисми пептиди мақсаднок ташаккул меёбад.Чунин пасмондаҳо - занҷирҳои пептидҳои нокифоя ифлосиҳои калидӣ мебошанд, ки дар синтези пептидҳои дароз тавлид мешаванд.Аз ин рӯ, дар синтези пептидҳои дароз, мушкилоти асосие, ки мо бояд бартараф кунем, омӯхтани шароити реаксияи баландсифат ва усулҳои реаксия мебошад, то реаксияи конденсатии аминокислотаҳо ҳамаҷониба ва пурратар шавад.Илова бар ин, вақти реаксияро кам кунед, зеро вақте ки вақти реаксия дарозтар бошад, аксуламалҳои тарафҳои идоранашаванда зиёдтаранд, маҳсулоти иловагиро мураккабтар мекунанд.Аз ин рӯ, се нуктаи зерин ҷамъбаст карда мешаванд:
Синтези микроволновкаро истифода бурдан мумкин аст: Барои баъзе аминокислотаҳо, ки дар раванди синтез дучор мешаванд, ки ба осонӣ пайваст шуданашон осон нест, синтези микроволновкаро метавон истифода бурд.Ин усул натиҷаҳои назаррас дорад ва вақти реаксияро хеле кам мекунад ва ташаккули ду маҳсулоти асосии иловагиро кам мекунад.
Усули синтези фрагментҳоро истифода бурдан мумкин аст: Вақте ки баъзе пептидҳоро бо усулҳои умумии синтез синтез кардан душвор аст ва тоза кардан осон нест, мо метавонем тамоми конденсатсияи якчанд аминокислотаро дар як сегменти муайяни пептид ба занҷири пептидӣ дар маҷмӯъ қабул кунем.Ин усул инчунин бисьёр масъалахои синтезро хал карда метавонад.
Синтези ацилгидразидро истифода бурдан мумкин аст: синтези acylhydrazide аз пептидҳо як усули синтези марҳилаи сахти N-terminal peptide Cys ва C-терминал полипептид гидразиди реаксияи интихобӣ байни ташаккули пайвандҳои амидӣ барои ба даст овардани усули пайванди пептидҳо.Дар асоси мавқеи Cys дар занҷири пептидӣ, ин усул тамоми занҷири пептидҳоро ба пайдарпаии сершумор тақсим мекунад ва онҳоро мутаносибан синтез мекунад.Ниҳоят, пептиди мақсаднок тавассути реаксияи конденсатии моеъ ба даст оварда мешавад.Ин усул на танхо мухлати синтези пептидхои дарозро хеле кам мекунад, балки тозагии махсулоти нихойро низ хеле зиёд мекунад.
Тозакунии пептидҳои дарозмуддат
Хусусияти пептидҳои дароз ногузир ба ҷузъҳои мураккаби пептидҳои хом оварда мерасонад.Аз ин рӯ, тоза кардани пептидҳои дароз аз ҷониби HPLC низ мушкил аст.силсилаи амилоидҳои раванди тозакунии полипептидҳо, азхудкунии таҷрибаи зиёд ва бомуваффақият дар тоза кардани пептидҳои дароз истифода мешаванд.Бо қабули таҷҳизоти нав, омехта кардани системаҳои тозакунии сершумор, ҷудокунии такрорӣ ва дигар усулҳои таҷриба, сатҳи муваффақияти тозакунии пептидҳои дароз хеле беҳтар карда шуд.
Вақти фиристодан: апрел-18-2023